Wie stelle ich mein Mikroskop richtig ein?
Die folgenden Erklärungen geben Ihnen nützliche Tipps zur Handhabung des Mikroskops für ein Urinsediment oder für Differenzialblutbilder.
Die folgenden Erklärungen geben Ihnen nützliche Tipps zur Handhabung des Mikroskops.
1. Einstellung für Urinsediment
Urinsediment beurteilen mit 40 Objektiv
A) Phasenkontrast PH:
- Kondensor nach oben schieben (helles Bild)
- Kondensorblende auf PH einstellen
- Phasenkontrastfilter einrasten
Wenn der Phasenkontrast nicht mehr funktioniert, muss man das Mikroskop eventuell justieren.
B) Einstellungen im Hellfeld (ohne Phasenkontrast):
- Kondensor etwas senken (abdunkeln)
- Kondensorblende auf 40x einstellen
- Phasenkontrastfilter nicht einrasten
C) Sediment färben mit Sternheimer-Malbin-Lösung:
Um Zellbestandteile zu färben, wendet man die Sternheimer-Malbin-Lösung an. Diese färbt Zellbestandteile, Epithelien und Zylinder schwach rosa an. Dieses Vorgehen wird vor allem dann angewendet, wenn kein Phasenkontrast vorhanden ist.
Vorgehen:
Zentrifugieren Sie den Urin, giessen Sie den Überstand ab und geben Sie erst dann 20 µl Sternheimer-Malbin direkt ins Sediment und mischen es leicht.
Mikroskop mit Phasenkontrast
2. Einstellung für Differenzialblutbilder
Blutbild differenzieren mit 100 Objektiv
Geben Sie das Immersionsöl direkt zwischen Objektiv und Objektträger. Das Öl sammelt alles Streulicht und ermöglicht, dass bei einer 1000fachen Vergrösserung die Blutzellen beurteilbar sind.
Hellfeld:
- Kondensor nach oben schieben
- Kondensorblende auf 100x einstellen
- Lichtquelle immer gut öffnen
3. Köhlersche Beleuchtung
Unter «Köhlersche Beleuchtung» versteht man die Optimierung der Ausleuchtung des Gesichtsfeldes. «Köhlern» ist nur am Mikroskop mit einer Leuchtfeldblende möglich.
Vorgehen:
- 10x Objektiv einschwenken und das Objekt scharf einstellen
- Leuchtfeldblendenring auf die kleinste Öffnungsweite einstellen
- Kondensorhöhe langsam absenken, um das Bild der Leuchtfeldblende scharf zu stellen
- Beide Zentrierschrauben des Kondensors durch Drehen so einstellen, dass sich das Bild der Leuchtfeldblende in der Mitte des Sehfeldes befindet
- Um die Zentrierung zu überprüfen und die Sehfeldausleuchtung einzustellen, die Blende öffnen, bis das Blendenbild die Ränder des Sehfeldes berührt
4. Wo liegt der Unterschied?
Was ist die Phasenkontrastmikroskopie?
Beim Phasenkontrast-Verfahren (Abbildungsverfahren) wird der Unterschied im Lichtbrechungsindex und der Dicke des Objekts zur Erzeugung eines Hell-Dunkel-Kontrasts genutzt. So ist eine direkte Abbildung von Strukturen möglich, die nur einen geringen Eigenkontrast aufweisen und bei Hellfeldmikroskopie nur mit künstlicher Einfärbung sichtbar wären (Zellen und Zylinder im Urinsediment).
Was ist die Hellfeldmikroskopie?
Bei der Hellfeldmikroskopie (Durchlichtverfahren) wird das reflektierte Licht vom Objektiv aufgefangen und das Objekt erscheint hell. Es werden vor allem farbige Präparate wie gefärbte Blutausstriche und Urinsediment optimal dargestellt.
Was ist die Dunkelfeldmikroskopie?
Die Dunkelfeldmikroskopie ist eine bereits seit über 250 Jahren bekannte Variante der Lichtmikroskopie. Sie führt zu einem dunklen Bildhintergrund, vor dem sich die zu beobachtenden Strukturen hell abheben. Dadurch können von durchsichtigen Objekten mit nur sehr geringem Kontrast dennoch gut aufgelöste, kontrastreiche Bilder erzeugt werden, ohne dass eine vorherige Färbung des Präparats erforderlich ist.